高壓層析柱是一種用于分離和純化化合物的重要工具,在各個(gè)領(lǐng)域中有廣泛的應(yīng)用。層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時(shí)應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。
此外, 直徑加大,洗脫液體體積增大,樣品稀釋度大。分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高度,分離度與柱高的平方根相關(guān),但由于軟凝膠柱過(guò)高擠壓變形阻塞,一般不超過(guò)1米。
本產(chǎn)品適用于分子篩、離子交換、凝膠滲透與親和層析。隨著液相層析法進(jìn)入血液制品生產(chǎn),利用層析法,可純化血漿中多種蛋白,例如白蛋白等等。越來(lái)越多生產(chǎn)單位相繼使用,效果甚佳,比較滿意。
層析柱,是色譜分析中的核心組件之一,主要用于分離混合物中的化合物。其原理基于化合物在柱內(nèi)填充物料的分配與再分配過(guò)程。
●分配過(guò)程:當(dāng)樣品混合物被注入層析柱后,化合物會(huì)在填料表面與移動(dòng)相(流動(dòng)相)進(jìn)行相互作用,部分化合物會(huì)與填料表面結(jié)合,而另一部分則不結(jié)合。這種分配過(guò)程導(dǎo)致不同化合物在填料中的分布不均,從而實(shí)現(xiàn)初步分離。
●再分配過(guò)程:隨著移動(dòng)相的不斷流動(dòng),化合物在填料中不斷進(jìn)行分配與再分配的過(guò)程,逐漸沿著柱的長(zhǎng)度被分離出來(lái)。不同化合物在填料中的分配系數(shù)(分配平衡常數(shù))不同,因此會(huì)在柱內(nèi)產(chǎn)生不同的保留時(shí)間,最終實(shí)現(xiàn)分離。
在層析柱中,填料的選擇、填充方式、操作條件(如移動(dòng)相的流速、溫度等)等因素會(huì)影響分離的效果。層析柱可以根據(jù)不同的原理和填料類(lèi)型,如反相層析、離子交換層析、親和層析等,用于不同類(lèi)型的化合物分離和純化。
柱層析的方法
高壓層析柱選型建議:
●根據(jù)應(yīng)用需求選擇柱型:根據(jù)分離的目標(biāo)物質(zhì)和樣品特性選擇合適的高壓層析柱類(lèi)型,例如反相柱、離子交換柱、親和層析柱等。
●確定柱尺寸:根據(jù)樣品的量和分離的需求確定高壓層析柱的尺寸,通常包括柱直徑和長(zhǎng)度。較大的柱直徑通常可以提高分離分辨率和樣品處理能力,而較長(zhǎng)的柱長(zhǎng)度通??梢蕴岣叻蛛x效率。
●選擇填料類(lèi)型:根據(jù)樣品的特性和分離的目標(biāo)選擇合適的填料類(lèi)型,例如C18反相填料、離子交換樹(shù)脂等。不同的填料對(duì)標(biāo)樣的親和性和分離效果有顯著影響。
●考慮操作壓力范圍:高壓層析柱通常需要在較高的操作壓力下運(yùn)行,因此需要確保系統(tǒng)的操作壓力范圍符合柱子的承受范圍。
高壓層析柱
行業(yè)應(yīng)用:
1.制藥工業(yè):高壓層析柱在制藥工業(yè)中被廣泛應(yīng)用于藥物分離和純化過(guò)程中。它可以用于分離和純化藥物原料、中間體和最終藥物產(chǎn)品,以及檢測(cè)和監(jiān)控這些化合物的純度和含量。
2.生物技術(shù):它可以用于分離和純化蛋白質(zhì)、多肽、核酸等生物大分子,實(shí)現(xiàn)對(duì)這些生物分子的提取、純化和分析。
3.環(huán)境監(jiān)測(cè):高壓層析柱可以用于環(huán)境樣品的分離和分析,如水樣、土壤樣等。通過(guò)高壓液相層析(HPLC)技術(shù),可以分離和檢測(cè)出其中的污染物、有機(jī)物、金屬離子等,為環(huán)境監(jiān)測(cè)和保護(hù)提供重要數(shù)據(jù)。
4.食品安全:它在食品科學(xué)和食品安全領(lǐng)域中具有重要作用。它可以用于檢測(cè)和分析食品中的添加劑、農(nóng)藥殘留、毒素、營(yíng)養(yǎng)成分等,并確保食品質(zhì)量和安全性。
5.化學(xué)分析:它在化學(xué)分析領(lǐng)域中被廣泛應(yīng)用。它可以用于各種化學(xué)樣品的分離和定性、定量分析,如有機(jī)化合物、天然產(chǎn)物、石油化工產(chǎn)品等。
高壓層析柱作為一種有效的分離和純化工具,在制藥、生物技術(shù)、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品安全、化學(xué)分析等領(lǐng)域都具有重要的應(yīng)用價(jià)值。不同的應(yīng)用需要選擇適合的層析柱類(lèi)型、填充材料和操作條件,以滿足特定的分離和分析需求。
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